熒光分光光度計(jì)是一種常用的光度計(jì)產(chǎn)品，主要用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜，被廣泛用于多個(gè)行業(yè)中。今天我們主要來(lái)介紹一下它的基本特點(diǎn)及操作，希望可以幫助用戶(hù)更好的應(yīng)用產(chǎn)品。

　　它能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定， 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化， 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。能夠?qū)?jīng)光源激發(fā)后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學(xué)處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成份分析，可應(yīng)用于生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化工等部門(mén)，可以說(shuō)是有很重要的用途。

　　基本測(cè)定：

　?。?）熒光激發(fā)光譜測(cè)定

　　設(shè)置熒光分光光度計(jì)參數(shù)，掃描發(fā)射波長(zhǎng)，找到maxλem，以此為發(fā)射波長(zhǎng)，記錄發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)波長(zhǎng)的函數(shù)，便得到激發(fā)光譜。

　?。?）熒光發(fā)射光譜測(cè)定

　　設(shè)置儀器參數(shù)，掃描激發(fā)波長(zhǎng)，找到maxλex，以此為激發(fā)波長(zhǎng)，記錄發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長(zhǎng)間的函數(shù)關(guān)系，便得到熒光發(fā)射光譜。

　　（3）差譜測(cè)定

　　設(shè)置儀器參數(shù)，選擇合適的工作方式，測(cè)定背景溶液的發(fā)射光譜并儲(chǔ)存起來(lái)，在一定的工作方式下，掃描樣品溶液的發(fā)射波長(zhǎng)，得到當(dāng)時(shí)的光度值和儲(chǔ)存的背景值之間的差示值，即差譜。

　?。?）峰面積積分

　　選擇適當(dāng)?shù)墓ぷ鞣绞?，?duì)樣品溶液進(jìn)行積分操作，即得到峰面積積分。

　　（5）熒光強(qiáng)度

　　選擇合適的測(cè)量參數(shù)，設(shè)置λex、λem，采用定點(diǎn)讀數(shù)或掃描方式，即可測(cè)得所選波長(zhǎng)處的熒光強(qiáng)度。

　　（6）定量測(cè)定

　　配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在一定的測(cè)定條件下，設(shè)置λex、λem，按照由稀至濃的次序，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度，繪制熒光強(qiáng)度—濃度的工作曲線(xiàn)，不改變熒光分光光度計(jì)參數(shù)測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度，由工作曲線(xiàn)即可求出未知溶液的濃度。