毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。
毛細(xì)管電泳儀出現(xiàn)無峰、峰變形、峰漂移怎么辦
檢查電流是否穩(wěn)定:
①?zèng)]有電流。
可能原因――毛細(xì)管堵塞或斷裂。
解決方法――用水沖洗毛細(xì)管,并觀察是否有水流出,若無水流出請(qǐng)拆下卡盒檢查毛細(xì)管兩端和窗口是否斷裂;毛細(xì)管沒有斷裂的話可以用水反向高壓沖洗以試圖解決此問題。緩沖溶液需要過濾,將樣品過濾或者離心去除其中的顆粒。
②電流波動(dòng)很大,直至幾乎消失。
可能原因――緩沖溶液中有氣泡產(chǎn)生或者區(qū)帶中樣品析出。
解決方法――將緩沖溶液超聲脫氣,如果還有此現(xiàn)象發(fā)生,則可能是樣品區(qū)帶有析出,可以通過降低樣品濃度/延長(zhǎng)ramp time來試圖解決這一問題;對(duì)于在緩沖溶液中溶解度不高的樣品則需要在緩沖溶液中加入添加劑以解決此問題。
③電流初始值較小,后逐漸增大。
可能原因――樣品進(jìn)樣量過大。
解決方法――減少進(jìn)樣量,通常進(jìn)樣參數(shù)設(shè)置在0.5psi,5sec左右。
問題二 樣品峰形不對(duì)稱
A、檢查毛細(xì)管入口:
可能原因――毛細(xì)管入口切口不平齊。
解決方法――重新切割毛細(xì)管入口,注意毛細(xì)管切割方法,不可以用力過猛或反復(fù)刮擦。
B、檢查更改樣品溶劑:
可能原因――緩沖溶液與樣品溶液電解率差別過大。
解決方法――可采用緩沖溶液作為樣品溶劑
問題三 遷移時(shí)間不穩(wěn)定
①出峰時(shí)間不穩(wěn)定且無規(guī)律:可能原因――緩沖溶液與毛細(xì)管內(nèi)壁平衡較慢。解決方法――每次樣品運(yùn)行之間避免用NaOH沖洗毛細(xì)管。
②出峰時(shí)間依次后延:可能原因――樣品中有物質(zhì)易發(fā)生吸附。解決方法――首先在每次樣品運(yùn)行之前用0.1N NaOH短時(shí)間沖洗毛細(xì)管,看遷移時(shí)間能否重復(fù),如果效果不佳請(qǐng)使用涂層毛細(xì)管來改善結(jié)果或者將樣品再次處理,以去除樣品中易吸附的組分。