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不知道實(shí)時(shí)熒光定量芯片PCR儀的工作原理?進(jìn)來(lái)看

更新時(shí)間:2021-07-22瀏覽:2387次

  實(shí)時(shí)熒光定量芯片PCR儀是分子生物學(xué)研究的重要工具,是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),基本原理是在試管中模擬細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制,即人為創(chuàng)造核酸半保留復(fù)制條件,使目的DNA在細(xì)胞外完成擴(kuò)增的過(guò)程,它可被看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制。
  實(shí)時(shí)熒光定量芯片PCR儀采用膜加熱及半導(dǎo)體熱泵制冷技術(shù)保證了升降溫的快速穩(wěn)定、儀器壽命長(zhǎng)的特點(diǎn),加有熱蓋保證了PCR無(wú)礦物油操作,避免了人為原因造成的污染。其中文Windows傳統(tǒng)界面更符合國(guó)人操作習(xí)慣,多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)填空式輸入降低了因參數(shù)設(shè)置所造成的事物;參數(shù)輸入提示保證了參數(shù)輸入的有效性。線(xiàn)性范圍廣、可檢測(cè)的樣品濃度線(xiàn)性范圍101~1010,靈敏度至小分辨率為1拷貝,重復(fù)性CV≤2.1%。
  實(shí)時(shí)熒光定量芯片PCR儀是將PCR技術(shù)的高效擴(kuò)增與原位雜交的細(xì)胞定位結(jié)合起來(lái),用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,從而在組織細(xì)胞原位檢測(cè)單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列。原位PCR技術(shù)的待檢標(biāo)本一般先經(jīng)化學(xué)固定,以保持組織細(xì)胞的良好形態(tài)結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜和核膜均具有一定的通透性,當(dāng)進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),各種成分,如引物、DNA聚合酶、核苷酸等均可進(jìn)進(jìn)細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi),以固定在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi)的RNA或DNA為模板,于原位進(jìn)行擴(kuò)增。
  由于被擴(kuò)增的DNA片段不同,其退火溫度也不同,通過(guò)梯度設(shè)置,可一次性篩選出退火溫度。這樣既可節(jié)省試驗(yàn)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率,又能節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。它對(duì)于在分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過(guò)程及病理的轉(zhuǎn)變有著重要意義。
  希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本儀器。

 

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